ДЕЙСТВИЕ АЛЬФА-ТОКОФЕРОЛА НА ЖИЗНЕСПОСОБНОСТЬ КЛЕТОК PC12 ПРИ ОКИСЛИТЕЛЬНОМ СТРЕССЕ И ЭКСПРЕССИЮ ГЕНОВ ПРО- И АНТИАПОПТОТИЧЕСКИХ БЕЛКОВ МИТОХОНДРИЙ, SOD2 И ФАКТОРОВ ТРАНСКРИПЦИИ NRF-1, NRF-2 И TFAM
PDF

Ключевые слова

клетки РС12
окислительный стресс
альфа-токоферол
про- и антиапоптотические белки митохондрий
супероксиддисмутаза 2
факторы транскрипци
регулируюшие биогенез митохондрий

Аннотация

Показано, что альфа-токоферол (альфа-Т) при длительной (18 ч) преинкубации с ним достоверно повышает жизнеспособность клеток нейрональной линии РС12, подвергнутых окислительному стрессу, в микромолярных и наномолярных концентрациях; а при 30-минутной преинкубации он эффективен только в микромолярных концентрациях. Методом полимеразной цепной реакции в реальном времени (RT-PCR) показано, что перекись водорода в большей мере увеличивает в клетках PC12 экспрессию проапоптотического белка Bax, чем антиапоптотического белка Bcl-xL. Напротив, преинкубация клеток с альфа-Т до действия перекиси водорода увеличивает экспрессию Bcl-xL, не меняя экспрессию Bax, что, очевидно, способствует нормализации под влиянием альфа-Т отношения Bax/Bcl-xL в клет- ках РС12, увеличенного при действии прооксиданта. Найдено, что альфа-Т достоверно увеличивает экспрессию обладающих разнообразными функциями, в частности, активирующих биогенез митохондрий, факторов транскрипции NRF-2 и TFAM (но не NRF-1) в контрольных клетках PC12; кроме того, он снижает в них отношение Bax/Bcl-xL, что показано методом иммуноблоттинга. При этом перекись водорода и преинкубация с альфа-Т не вызывали достоверных изменений в экспрессии NRF-1, NRF-2 и TFAM в клетках PC12. Преинкубация с альфа-Т повышает экспрессию супероксиддисмутазы 2 (SOD2) в клетках PC12 на более ранних сроках после добавления перекиси водорода, чем при действии одного прооксиданта. Таким образом, в защитный эффект альфа-Т на клетки PC12 при окислительном стрес- се, по-видимому, вносят вклад нормализация отношения Bаx/Bcl-xL и сравнительно раннее увеличение экспрессии SOD2. Увеличение альфа-Т экспрессии NRF-2 и TFAM в контрольных клетках РС12 позволяет  предполагать  небольшое  усиление  им  процесса  биогенеза  митохондрий.  Но  в  условиях окислительного стресса, для которого характерен дефицит макроэргов, активации под влиянием альфа-Т энергоемкого процесса биогенеза митохондрий в клетках РС12 не выявлено.

PDF