Аннотация
Целью настоящей работы было проведение морфологического анализа гемоцитов, нахождение ОЧГ и процентной доли каждого типа гемоцитов австралийского красноклешневого рака (Cherax quadricarinatus). Изучали гемоциты в нативной, обработанной антикоагулянтом и окрашенной по Май-Грюнвальду и Романовскому гемолимфе. Гемолимфу отбирали шприцом из вентрального синуса. Микроскопию проводили при увеличении объектива 40× или 100×. Подсчёт гемоцитов и определение процентной доли каждого типа производили в камере Горяева. Выделено три основных типа гемоцитов, а также обнаружены клетки морфологически отличающиеся от первых трёх, они названы прозрачными клетками. Агранулоциты (гиалиноциты) – клетки овальной или веретенообразной формы, длиной и шириной порядка 26.6 и 9.2 мкм. У них отсутствуют гранулы, однако иногда можно обнаружить малое число размером менее 0.5 мкм. Этот тип клеток способен дольше других оставаться на предметном стекле после извлечения. Полугранулоциты – клетки овальной или веретенообразной формы, длиной и шириной 26.7 и 9.3 мкм, с умеренно развитыми небольшими гранулами размером менее 0.5 мкм и редко встречающимися средними гранулами размером от 0.77 до 1.69 мкм. Гранулоциты – клетки овальной формы, наиболее крупные из всех типов с длиной и шириной 28.7 и 11.1 мкм. Имеют крупные (0.8–2.48 мкм) обильно развитые гранулы и высокое лучепреломление, ввиду чего этот тип клеток хорошо определим под микроскопом. У них наблюдается наименьшее по сравнению с первыми двумя типами ядерно-цитоплазматическое отношение. Прозрачные клетки – особенностью данного типа клеток являются обильно развитые псевдоподии. Среднее значение диаметра клетки после её округления составляет 10.7 ± 1.11 мкм. Клетки этого типа начинают проявляться через 10 мин после извлечения в необработанной антикоагулянтом гемолимфе. Доминирующим типом в гемолимфе являются агранулоциты, их доля составляет 48.3 ± 11.4%. На долю полугранулоцитов и гранулоцитов приходится 26.3 ± 7.8% и 25.2 ± 6.9% соответственно. Общее число гемоцитов колеблется в широком диапазоне от 820 до 5510 шт./мкл, среднее количество клеток составляет 2707 ± 1096 шт./мкл. Средняя доля прозрачных клеток составила 18.2 ± 3.8%.
Литература
Johansson MW, Keyser P, Sritunyalucksana K, Söderhäll K (2000) Crustacean haemocytes and haematopoiesis. Aquaculture 191(1–3):45–52. https://doi.org/10.1016/s0044-8486(00)00418-x
Cerenius L, Jiravanichpaisal P, Liu H, Söderhäll I (2010) Crustacean Immunity. In: Söderhäll, K. (eds) Invertebrate Immunity. Advanc Experiment Med Biol 708. Springer, Boston, MA. https://doi.org/10.1007/978-1-4419-8059-5_13
Александрова EH, Ковачева НП (2010) Прижизненное определение физиологического статуса десятиногих ракообразных (Сrustacea: Decapoda) по гематологическим показателям. Усп Физиол Наук 41(2):51–67. [Alexandrova EH, Kovatcheva NP (2010) In life determination of the physiological status of decapod crustaceans (Crustacea: Decapoda) by hematological characteristics. Prog Physiol Sci 41(2) 51–67. (In Russ)].
Ковачева НП, Александрова ЕН (2010) Гематологические показатели как индикаторы физиологического состояния декапод: камчатского краба Paralithodes camtschaticus и речных раков родов Astacus и Pontastacus. М.: Изд. ВНИРО. [Kovatcheva NP, Aleksandrova EN (2010) Hematological parameters as an indicators of physiological status of the decapods: red king crab Paralithodes camttshaticus and freshwater crayfish genus Astacus and Pontastacus. VNIRO Publishing, Moscow. (In Russ)].
Аджиев ДД, Пронина ГИ, Иванов АА, Корягина НЮ (2018) Функциональные показатели пойкилотермных гидробионтов из природных и искусственных водных биоценозов. Сельскохоз Биол 53(2):337–347. [Adzhiev DD, Pronina GI, Ivanov AA, Koryagina NYU (2018) Functional indicators of poikilothermic aquatic species from natural and artificial water biocenoses. Sel’skokhoz biol [Agricult Biol] 53(2):337–347. (In Russ)]. https://doi.org/10.15389/agrobiology.2018.2.337rus
Иванов АА, Пронина ГИ, Корягина НЮ, Ревякин АО (2013) Гомеостаз внутренней среды гидробионтов: видовые особенности хладнокровных. Изв Тимиряз Сельскохоз Акад (3):75–88. [Ivanov AA, Pronina GI, Koryagina NYu, Revyakin AO (2013) Internal environment homeostasis of hydrobionts: specific peculiarities of cold-blooded animals. Izvest Timiryazev Agricult Acad (3):75–88 (In Russ)].
Пронина ГИ, Корягина НЮ (2014) Комплексная прижизненная физиологическая оценка речных раков в аквакультуре. Теор Прикладн Пробл Агропром Компл (4):46–48. [Pronina GI, Koryagina NYu (2014) Comprehensive intravital physiological assessment of crayfishes in aquaculture. Theor Appl Probl Agro-industrial Complex (4):46–48. (In Russ)].
Roulston C, Smith VJ (2011) Isolation and in vitro characterisation of prohaemocytes from the spider crab, Hyas araneus (L.). Devel Comparat Immunol 35(5):537–544. https://doi.org/10.1016/j.dci.2010.12.012
Mix MC, Sparks AK (1980) Hemocyte classification and differential counts in the dungeness crab, Cancer magister. J Invertebr Pathol 35(2):134–143. https://doi.org/10.1016/0022-2011(80)90176-7
Sternshein DJ, Burton PR (1980) Light and3 electron microscopic studies of crayfish hemocytes. J Morphol 165(1):67–83. https://doi.org/10.1002/jmor.1051650107
Martin GG, Graves BL (1985) Fine structure and classification of shrimp hemocytes. J Morphol 185:339–348. https://doi.org/10.1002/jmor.1051850306
Tsing A, Arcier J-M, Brehélin M (1989) Hemocytes of Penaeid and Palaemonid shrimps: Morphology, cytochemistry, and hemograms. J Invertebr Pathol 53(1):64–77. https://doi.org/10.1016/0022-2011(89)90075-x
Hose JE, Martin GG, Gerard AS (1990) A decapod hemocyte classification scheme integrating morphology, Cytochemistry, and Function. Biol Bull 178(1):33–45. https://doi.org/10.2307/1541535
Jussila J (1997) Physiological responses of Astacid and Parastacid Crayfishes (Crustacea: Decapoda) to conditions of intensive culture. doc. dissertation. Perth: University of Kuopio.
Hijran YY, Hasan HA (2002) Haemocyte Classification and Differential Counts in the Freshwater Crab, Potamon fluviatilis. Tukr J Vet Anim Sci 26:403–406.
Zhang ZF, Shao M, Kang KH (2006) Classification of haematopoietic cells and haemocytes in Chinese prawn Fenneropenaeus chinensis. Fish & Shellfish Immunol 21:159–169. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2005.11.003
Giulianini PG, Bierti M, Lorenzon S, Battistella S, Ferrero EA (2007) Ultrastructural and functional characterization of circulating hemocytes from the freshwater crayfish Astacus leptodactylus: Cell types and their role after in vivo artificial non-self challenge. Micron 38(1)49–57. https://doi.org/10.1016/j.micron.2006.03.019
Li C, Shields JD (2007) Primary culture of hemocytes from the Caribbean spiny lobster, Panulirus argus, and their susceptibility to Panulirus argus Virus 1 (PaV1). J Invertebr Pathol 94(1):48–55. https://doi.org/10.1016/j.jip.2006.08.011
Taylor S, Landman MJ, Ling N (2009) Flow сytometric characterization of freshwater crayfish hemocytes for the examination of physiological status in wild and captive animals. Journal of Aquatic Animal Health 21(3)195–203. https://doi.org/10.1577/h09-003.1
Ding ZZ, Du JJ, Ou JJ, Li WW, Wu TT, Xiu YY, Meng QQ, Ren QQ, Gu WW, Xue HH, Tang JJ, Wang WW (2012) Classification of circulating hemocytes from the red swamp crayfish Procambarus clarkii and their susceptibility to the novel pathogen Spiroplasma eriocheiris in vitro. Aquaculture 356–357:371–380. https://doi.org/10.1016/j.aquaculture.2012.04.042
Du J, Zhu H, Ren Q, Liu P, Chen J, Xiu Y, Yao W, Meng Q, Gu W, Wang W (2012) Flow cytometry studies on the Macrobrachium rosenbergii hemocytes sub-populations and immune responses to novel pathogen spiroplasma MR-1008. Fish & Shellfish Immunol 33(4):795–800. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2012.07.006
Lv SS, Xu JJ, Zhao JJ, Yin NN, Binjie Lu B, Li SS, Chen YY, Xu HH (2014) Classification and phagocytosis of circulating haemocytes in Chinese mitten crab (Eriocheir sinensis) and the effect of extrinsic stimulation on circulating haemocytes in vivo. Fish & Shellfish Immunol 39(2)415–422. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2014.05.036
Battison A, Cawthorn R, Horney B (2003) Classification of Homarus americanus hemocytes and the use of differential hemocyte counts in lobsters infected with Aerococcus viridans var. homari (Gaffkemia). J Invertebr Pathol 84(3)177–197. https://doi.org/10.1016/j.jip.2003.11.005
Лагуткина ЛЮ, Пономарев СВ (2008) Новый объект тепловодной аквакультуры – австралийский красноклешневый рак (Cherax quadricarinatus). Вестник АГТУ (6):220–223. [Lagutkina L.Yu., Ponomarev S.V. 2008. New object of аquaculture – australian redclaw crayfish (Cherax quadricarinatus). Vestnik AGTU (6):220–223.].
Лагуткина ЛЮ, Кузьмина ЕГ, Таранина АА, Ахмеджанова АБ, Ясинский ВС, Пономарев РА (2020) Фактологическое обеспечение практик повышения эффективности выращивания тропических пресноводных видов. Вестник Астраханского государственного технического университета. Серия: Рыбное хозяйство (2):94–105. [Lagutkina LYU, Kuzmina EG, Taranina AA, Ahmedzhanova AB, Yasinskij VS, Ponomarev RA (2020) Factual support of practices to increase the efficiency of cultivation of tropical freshwater species. Bulletin of the Astrakhan State Technical University. Series: Fisheries (2): 94–105. (In Russ)] https://doi.org/10.24143/2073-5529-2020-2-94-105
Лагуткина ЛЮ, Кузьмина ЕГ, Таранина АА, Ахмеджанова АБ, Ясинский ВС, Пономарев РА (2020) Фактологическое обеспечение практик повышения эффективности выращивания тропических пресноводных видов. Вестн Астрахан Гос Технич Универ Серия: Рыбное хозяйство (2):94–105. [Lagutkina LYU, Kuzmina EG, Taranina AA, Ahmedzhanova AB, Yasinskij VS, Ponomarev RA (2020) Factual support of practices to increase the efficiency of cultivation of tropical freshwater species. Bull Astrakhan State Techn Univers Series: Fisheries (2):94–105. (In Russ)]. https://doi.org/10.24143/2073-5529-2020-2-94-105
Li F, Zheng Z, Li H, Fu R, Xu L, Yang Fet al (2021) Crayfish hemocytes develop along the granular cell lineage. Sci Rep 11(1): 13099. https://doi.org/10.1038/s41598-021-92473-9
Duan H, Jin S, Zhang Y, Li F, & Xiang J (2014) Granulocytes of the red claw crayfish Cherax quadricarinatus can endocytose beads, E. coli and WSSV, but in different ways. Develop & Compar Immunol 46(2):186–193. https://doi.org/10.1016/j.dci.2014.04.006
Li F, Chang X, Xu L, Yang F (2018) Different roles of crayfish hemocytes in the uptake of foreign particles. Fish & Shellfish Immunol 77:112–119. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2018.03.029
Li F, Xu L, Hui X, Huang W, Yang F (2019) Directed differentiation of granular cells from crayfish hematopoietic tissue cells. Fish & Shellfish Immunol 88:28–35. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2019.02.054
Zhu K, Yang F, Li F (2022) Molecular markers for hemocyte subpopulations in crayfish Cherax quadricarinatus. Devel & Comparat Immunol 132: 104407. https://doi.org/10.1016/j.dci.2022.104407
Mauro M, Arizza V, Arculeo M, Attanzio A, Pinto P, Chirco P, Badalamenti G, Tesoriere L, Vazzana M (2022) Haemolymphatic Parameters in Two Aquaculture Crustacean Species Cherax destructor (Clark, 1836) and Cherax quadricarinatus (Von Martens, 1868). Animals 12(5) 543. https://doi.org/10.3390/ani12050543
Лагуткина ЛЮ, Евграфова ЕМ, Кузьмина ЕГ, Мазлов АМ (2021) Гематологические и биохимические показатели гемолимфы австралийского красноклешневого рака. Вестник Астраханского государственного технического университета. Серия: Рыбное хозяйство (2):134–143. [Lagutkina LYu, Evgrafova EM, Kuzmina EG, Mazlov AM (2021) Hematological and biochemical indicators of Australian red-claw crayfish hemolymph. Bulletin of the Astrakhan State Technical University. Series: Fishing Industry (2):134–143. (In Russ)]. https://doi.org/10.24143/2073-5529-2021-2-134-143
Wentao Z, Wen L, Yunlong Z, Danli W, Zhongxiang M, Getao S (2017) Ultrastructural and immunocytochemical analysis of circulating hemocytes from Cherax quadricarinatus (von Martens, 1868). Indian J Anim Res 51(1):129–134. https://doi.org/10.18805/ijar.v0iOF.6823
Romero, X., Turnbull, J. F., & Jiménez, R. (2000). Ultrastructure and Cytopathology of a Rickettsia-like Organism Causing Systemic Infection in the Redclaw Crayfish, Cherax quadricarinatus (Crustacea: Decapoda), in Ecuador. J Invertebr Pathol 76(2):95–104. https://doi.org/10.1006/jipa.2000.4952
Sánchez-Salgado JL, Pereyra MA, Agundis C, Calzada-Ruiz M, Kantun-Briceño E, Zenteno E (2019) In vivo administration of LPS and β-glucan generates the expression of a serum lectin and its cellular receptor in Cherax quadricarinatus. Fish & Shellfish Immunol 94:10–16. https://doi.org/10.1016/j.fsi.2019.08.061
Wu D-L, Liu Z-Q, Huang Y-H, Lv W-W, Chen M-H, Li Y-M, Zhao Y-L (2018) Effects of cold acclimation on the survival, feeding rate, and non-specific immune responses of the freshwater red claw crayfish (Cherax quadricarinatus). Aquacult Internat 26(2):557–567. https://doi.org/10.1007/s10499-018-0236-4
Paterson BD, Spanogle PT, Davidson GW, Hosking W, Nottingam S, Jussila J, Evans LH (2005) Prediction survival of western rock lobster Panuluris cygnus, using discriminant analysis of hemolymph parameters taken immediately following simulated handling treatments. New Zealand J Marine Freshwat Res 39(5):1129–1143. https://doi.org/10.1080/00288330.2005.9517380
Lin X, Söderhäll I (2011) Crustacean hematopoiesis and the astakine cytokines. Blood 117(24):6417–6424. https://doi.org/10.1182/blood-2010-11-320614
Sukhachev AN, Dyachkov IS, Romanyuk DS, Kumeyko VV, Sinitsina VF, Korolkova ED, Kharazova AD, Polevshchikov AV (2013) Morphological analysis of hemocytes of ascidian Halocynthia aurantium. Cell Tiss Biol (Tsitologiya) 55(12):901–906.
Ghiretti-Magaldi A, Milanesi C, Tognon G (1977) Hemopoiesis in crustacea decapoda: origin and evolution of hemocytes and cyanocytes of Carcinus maenas. Cell Different 6(3–4):167–186. https://doi.org/10.1016/0045-6039(77)90014-8
Мартынова МГ, Быстрова ОМ, Парфенов ВН (2008) Синтез нуклеиновых кислот и локализация предсердного натрийуретического пептида в гемоцитах речного рака. Цитология 50(3)243–248. [Martynova MG, Bystrova OA, Parfenov VN (2008) Synthesis of nucleic acids and localization of atrial natriuretic peptide in the crayfish haemocytes. Cell Tiss Biol (Tsitologiya) 50(3)243–248. (In Russ)].
Van de Braak CBT, Botterblom MHA, Liu W, Taverne N, van der Knaap WPW, Rombout JHWM (2002) The role of the haematopoietic tissue in haemocyte production and maturation in the black tiger shrimp (Penaeus monodon). Fish & Shellfish Immunol 12(3)253–272. https://doi.org/10.1006/fsim.2001.0369
Иванов АА, Пронина ГИ, Корягина НЮ (2021) Физиология гидробионтов. СПб: Лань. [Ivanov AA, Pronina GI, Koryagina N YU (2021) Physiology of hydrobionts. SPB: Lan (In Russ)].
Xu X, Duan H, Shi Y, Xie S, Song Z, Jin S, Li F, Xiang J (2018) Development of a primary culture system for haematopoietic tissue cells from Cherax quadricarinatus and an exploration of transfection methods. Develop & Comparat Immunol 88:45–54. https://doi.org/10.1016/j.dci.2018.07.006
Пронина ГИ, Корягина НЮ (2015) Референсные значения физиолого-иммунологических показателей гидробионтов разных видов. Вестник Астраханского государственного технического университета. Серия: Рыбное хозяйство 4:103–108. [Pronina GI, Koryagina NYU (2015) Reference values of physiological and immunological parameters of hydrobionts of different species. Bulletin of the Astrakhan State Technical University. Series: Fisheries 4:103–108. (In Russ)].
Liu YT, Chang CI, Hseu JR, Liu KF, & Tsai JM (2013). Immune responses of prophenoloxidase and cytosolic manganese superoxide dismutase in the freshwater crayfish Cherax quadricarinatus against a virus and bacterium. Molec Immunol 56(1-2):72–80. https://doi.org/10.1016/j.molimm.2013.03.023
Bone JWP, Renshaw GMC, Furse JM, & Wild CH (2014). Using biochemical markers to assess the effects of imposed temperature stress on freshwater decapod crustaceans: Cherax quadricarinatus as a test case. J Compar Physiol B 185(3):291–301. https://doi.org/10.1007/s00360-014-0883-3