@article{Шварц_Дёмина_Захарова_Коваленко_Грязнова_Ищенко_Зайцев_2022, title={ОЦЕНКА СТАБИЛЬНОСТИ РЕФЕРЕНСНЫХ ГЕНОВ В МОЗГЕ КРЫС ПРИ ПРОВЕДЕНИИ АНТИОКСИДАНТНОЙ И ПРОТИВОВОСПАЛИТЕЛЬНОЙ ТЕРАПИИ В ЛИТИЙ-ПИЛОКАРПИНОВОЙ МОДЕЛИ ВИСОЧНОЙ ЭПИЛЕПСИИ}, volume={108}, url={https://rusjphysiol.org/index.php/rusjphysiol/article/view/1635}, DOI={10.31857/S0869813922060073}, abstractNote={<p class="western" style="line-height: 150%; text-indent: 0cm; margin-bottom: 0cm;" lang="ru-RU">Обратная транскрипция в сочетании с количественной (в реальном времени) полимеразной цепной реакцией (ОТ-кПЦР) является золотым стандартом для оценки экспрессии генов на уровне РНК, однако требует тщательного выбора валидных референсных генов для нормализации результатов. Целью данной работы было определение оптимальных референсных генов для ОТ-кПЦР экспериментов в височной коре и дорзальном гиппокампе мозга крыс в латентную фазу (период эпилептогенеза до появления спонтанных рецидивирующих судорог) литий-пилокарпиновой модели височной эпилепсии на фоне раздельного или сочетанного применения рекомбинантного провоспалительного цитокина – рецепторного антагониста интерлейкина-1 (100 мг/кг в сутки) и комбинации антиоксидантов (100 мг/кг витамина С, 200 мг/кг витамина Е, 25 мкг/кг <span lang="en-US">S</span>-аденозилметионина). Была проанализирована экспрессия 9 референсных генов (<span lang="en-US"><em>Actb</em></span><em>, </em><span lang="en-US"><em>B</em></span><em>2</em><span lang="en-US"><em>m</em></span><em>, </em><span lang="en-US"><em>Gapdh</em></span>, <span lang="en-US"><em>Rpl</em></span><em>13</em><span lang="en-US"><em>a</em></span><em>, </em><span lang="en-US"><em>Sdha</em></span><em>, </em><span lang="en-US"><em>Ppia</em></span><em>,</em><span lang="en-US"><em>Hprt</em></span><em>1, </em><span lang="en-US"><em>Pgk</em></span><em>1, </em><span lang="en-US"><em>Ywhaz</em></span><em>).</em> С помощью сервиса <span lang="en-US">RefFinder</span>® мы определили оптимальные референсные гены для оценки уровня содержания целевых мРНК в дорзальном гиппокампе (<span lang="en-US"><em>Gapdh</em></span><em>, </em><span lang="en-US"><em>Pgk</em></span><em>1</em>, <span lang="en-US"><em>Hprt</em></span><em>1</em>) и височной коре (<span lang="en-US"><em>Pgk</em></span><em>1, </em><span lang="en-US"><em>Sdha</em></span><em>, </em><span lang="en-US"><em>Ppia</em></span>) головного мозга. При этом было выявлено значимое усиление экспрессии генов <span lang="en-US"><em>Actb</em></span> и <span lang="en-US"><em>B</em></span><em>2</em><span lang="en-US"><em>m</em></span> в дорзальном гиппокампе, которое не подавлялось ни применением <span lang="en-US">IL</span>-1<span lang="en-US">ra</span>, ни смесью антиоксидантов, ни их сочетанием. Мы также оценили уровень экспрессии гена провоспалительного цитокина интерлейкина-1 бета (<span lang="en-US"><em>Il</em></span><em>1</em><span lang="en-US"><em>b</em></span>) в дорзальном гиппокампе, нормируя его относительно трёх оптимальных (<span lang="en-US"><em>Gapdh</em></span><em>, </em><span lang="en-US"><em>Pgk</em></span><em>1</em>, <span lang="en-US"><em>Hprt</em></span><em>1</em>) референсных генов либо относительно нестабильных <span lang="en-US"><em>Actb</em></span> и <span lang="en-US"><em>B</em></span><em>2</em><span lang="en-US"><em>m</em></span><em>. </em>В случае использования оптимальных референсных генов было обнаружено, что экспрессия гена <span lang="en-US"><em>Il</em></span><em>1</em><span lang="en-US"><em>b</em></span> увеличивается в латентную фазу литий-пилокарпиновой модели эпилепсии, и ни один из видов терапии не изменяет этой реакции<em>.</em> При нормировке относительно уровня мРНК <span lang="en-US"><em>Actb</em></span> и <span lang="en-US"><em>B</em></span><em>2</em><span lang="en-US"><em>m</em></span><em>, </em>изменения экспрессии гена <span lang="en-US"><em>Il</em></span><em>1</em><span lang="en-US"><em>b</em></span> в дорзальном гиппокампе в латентную фазу литий-пилокарпиновой модели не выявляются<em>.</em> Исходя из этого, гены <span lang="en-US"><em>Actb</em></span> и <span lang="en-US"><em>B</em></span><em>2</em><span lang="en-US"><em>m</em></span> могут быть вовлечены в процесс эпилептогенеза и не могут использоваться в качестве референсных в эпилептических моделях. Таким образом, результаты нашей работы демонстрируют важность аккуратного выбора референсных генов.</p&gt;}, number={6}, journal={Российский физиологический журнал им. И. М. Сеченова}, author={Шварц, Александр Павлович and Дёмина, Александра Владимировна and Захарова, Мария Владимировна and Коваленко, Анна Андреевна and Грязнова, Маруся Олеговна and Ищенко, Александр Митрофанович and Зайцев, Алексей Васильевич}, year={2022}, month={май}, pages={781–792}